酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)ELISA試劑盒使用原理

    ELISA試劑盒的原理是?抗原與抗體的特異性結(jié)合+酶催化顯色放大?，通過顏色深淺定量檢測(cè)目標(biāo)物的含量。

    基礎(chǔ)流程

    先將已知抗原/抗體固定在微孔板等固相載體表面，加入待測(cè)樣本后，樣本中的對(duì)應(yīng)抗體/抗原會(huì)與固相載體上的物質(zhì)發(fā)生特異性結(jié)合，再加入酶標(biāo)記的抗體，形成免疫復(fù)合物。

    信號(hào)放大與定量

    酶標(biāo)記物中的酶可催化底物發(fā)生顯色反應(yīng)，比如TMB底物會(huì)從無色變?yōu)樗{(lán)色，加終止液后轉(zhuǎn)為穩(wěn)定黃色，顏色深淺與目標(biāo)物濃度正相關(guān)，通過酶標(biāo)儀讀取450nm波長(zhǎng)下的吸光度值，結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)曲線就能算出待測(cè)物的準(zhǔn)確含量。

    不同檢測(cè)模式適配場(chǎng)景

    雙抗體夾心法：用兩個(gè)抗體“夾住"大分子抗原，適合檢測(cè)蛋白質(zhì)、抗原等，靈敏度和特異性高。

    競(jìng)爭(zhēng)法：適配激素、藥物等小分子物質(zhì)，樣本中目標(biāo)物越多，最終顯色越淺。

    間接法：多用于抗體檢測(cè)，比如疫苗效價(jià)測(cè)定，通過酶標(biāo)二抗放大信號(hào)。

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