ELISA實驗：血清樣本操作參考

　　ELISA實驗血清樣本全流程操作參考，覆蓋采集、處理、保存全環(huán)節(jié)關(guān)鍵參數(shù)：

　　操作環(huán)節(jié) 具體參數(shù)要求

　　血液采集 采血管：無抗凝劑、無熱原/內(nèi)毒素試管;推薦采血量：3~5mL

　　凝固處理 室溫靜置30min~2h自然凝固，或4℃冰箱過夜靜置

　　離心分離 離心條件：4℃，1000×g 離心15~20min(或3000轉(zhuǎn)/分 離心10min)

　　樣本用量 常規(guī)檢測單孔需50~100μl血清，做復孔需預留2倍以上體積

　　短期保存 2~8℃密封存放，最長可保存7天

　　長期凍存 分裝為100~200μl/管，-20℃可保存1個月，-80℃可保存6個月以上

　　樣本復融 取出后置于室溫環(huán)境緩慢均衡至融化，輕柔顛倒混勻

　　異常樣本處理 出現(xiàn)沉淀/絮狀物：4℃ 1000×g再次離心10min，取上清檢測;輕度高脂樣本可按1:4比例用生理鹽水稀釋后檢測

　　注意事項：

　　全程避免劇烈搖晃，防止機械性溶血

　　禁止高溫加熱促凝，避免蛋白變性失活

　　小心吸取上層淡黃色清亮血清，嚴禁觸碰下層血細胞層

　　提前預估檢測指標數(shù)量，預留充足樣本量備用

　　僅適用于3天內(nèi)可完成檢測的無菌分離樣本，有菌樣本禁止2~8℃長期存放

　　嚴格避免反復凍融，凍存管標注清晰樣本編號、采集日期

　　禁止水浴加熱快速融解，禁止劇烈渦旋振蕩

　　重度溶血、嚴重脂血、細菌污染樣本直接棄用，避免造成假陽性/假陰性結(jié)果

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