天正信達(dá)向您介紹ELISA試劑操作加樣與洗板

　　一、ELISA加樣操作要點(diǎn)

　　基礎(chǔ)規(guī)范?：加樣前將試劑、樣本平衡至室溫，使用校準(zhǔn)后的低吸附槍頭，每加完一個(gè)樣本更換槍頭，避免交叉污染。

　　操作細(xì)節(jié)?：垂直懸空加樣，槍頭不接觸孔壁，對(duì)準(zhǔn)孔底緩慢注入液體，避免產(chǎn)生氣泡;若出現(xiàn)氣泡，輕彈板底消除，防止干擾后續(xù)讀數(shù)。

　　排布要求?：標(biāo)準(zhǔn)品從高濃度到低濃度依次加樣，所有標(biāo)準(zhǔn)品、樣本設(shè)置雙孔，同時(shí)預(yù)留空白孔、陽(yáng)性/陰性對(duì)照孔，保障數(shù)據(jù)可靠性。

　　二、ELISA洗板操作要點(diǎn)

　　前期準(zhǔn)備?：提前按說(shuō)明書(shū)稀釋濃縮洗滌液，若冷藏后析出結(jié)晶，37℃水浴溶解后再配制，使用新鮮去離子水，現(xiàn)配現(xiàn)用。

　　手工洗板?：棄去孔內(nèi)反應(yīng)液后，每孔加滿300-350μL洗滌液，靜置浸泡30-60秒后甩干，在無(wú)塵吸水紙上拍凈殘留液體，按要求重復(fù)3-5次，全程避免孔內(nèi)長(zhǎng)時(shí)間干涸。

　　自動(dòng)洗板?：提前沖洗管路，設(shè)置每孔注液250-300μL、浸泡30秒，調(diào)整針頭高度避免刮傷孔底，程序結(jié)束后輕拍酶標(biāo)板去除殘留液。

　　三、注意事項(xiàng)

　　加樣后及時(shí)貼緊封板膜，減少液體蒸發(fā)引發(fā)的邊緣效應(yīng)，保證孵育溫度穩(wěn)定。

　　洗板次數(shù)嚴(yán)格遵循說(shuō)明書(shū)，次數(shù)不足會(huì)導(dǎo)致背景偏高，次數(shù)過(guò)多易洗脫有效結(jié)合物，降低檢測(cè)信號(hào)。

　　最后一次洗板后需拍干，避免殘留洗滌液稀釋后續(xù)試劑，造成顯色偏淺、結(jié)果偏差。

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